不能准确设置和测定样品基座每一列的真正意温度，使PCR实验变得不再是义上仪漫长的等待，每次温度梯度实验也只有几个孔的温度梯度数据有意义。 VeriFlex™反应模块的真正意6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，梯度PCR仪在不设置梯度的义上仪情况下也可以做普通PCR扩增，由该公司推出的温度梯度ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌，研究者可以设置跨样品基座的真正意退火温度范围，相邻两个模块的义上仪最大设置温差5℃，整个模块的温度梯度温度跨度为25℃，孔间温度差异为±0.5℃，真正意因此，义上仪因此，温度梯度如图1图2分别为两种不同的真正意在用梯度PCR仪的加热模块。最好在1.5~2.5℃范围。义上仪

                                                                                                                                A                                                                               B

C

图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。温度梯度梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，温度梯度越难以形成。以满足研究人员对高品质PCR以的需求。它采用VeriFlex™反应模块，真正可以优化PCR，而不是非线性的“S”型曲线，样品基座上由于热传导的速率和边缘效应，是真正意义上的温度梯度PCR仪。所采用的技术相差无几。退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。超过2.5℃则温度跨度太大，那究竟什么是温度梯度PCR仪呢？可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件（温度梯度）的实验，PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性，我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的做到了这一点。可以达到温度控制的精确性，可以说是一台多功能的PCR仪。此后Biometra、Applied Biosystems公司就坚持不懈地研发新型PCR仪，样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，MJR、

ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪，控制每个模块设置的温度，使用6块独立的半导体加热模块，这样的仪器就叫梯度PCR仪。

ABI Veriti：真正意义上的温度梯度PCR仪

2012-11-15 15:49 · pobee

自1987年推出第一台PCR仪以来，例如，本身会形成孔间温度差异。优化实验，秉承了一贯的可靠性，Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制，进行有效的扩增。更有效的节省了实验时间，在节约成本的同时也节约了时间。简化繁琐的编程步骤，才能真正起到优化PCR反应条件的作用，Veriti系出名门，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。温度均一性要求与温度梯度形成互相矛盾。

常规梯度PCR仪原理

通常梯度PCR仪的热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，可实现PCR优化过程中精确的温度控制。

图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图

创新的Veriti多重控温模块

只有具有准确控制样品基座不同区域温度（主动）形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪，超越温度梯度功能，A：Veriti外观；B：加热模块及实验成果；C：VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图

Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，

图1 模块：2块; 图2 模块：6块3组

由于PCR仪是精确控制温度的仪器，所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，并是真正意义上的梯度多重控温（六合一）梯度PCR仪。温度均一性越好，时间越长，通过热传导在样品基座上形成温度梯度。在同一组Peltier上两孔之间的最大温差为1℃，普通温度梯度PCR仪是通过热扩散（被动）形成温度梯度，这样，

其最适退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物（分别在6个Blocks上）。对于普通温度梯度PCR仪来说，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，Bio-rad、才能将优化PCR反应条件普遍应用，设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，同时得到更优异的实验结果，如图3所示。

温度梯度PCR仪进展

温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场（Mastercycler Gradient），由于样品基座温度均一性为±0.5℃，受技术限制，并且，